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臭氧氧化后可提高含林可霉素廢水的可生化性

 

        中國是世界上抗生素生產(chǎn)大國，是青霉素、四環(huán)素和林可霉素等發(fā)酵類抗生素的主要生產(chǎn)基地。在抗生素發(fā)酵生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的廢母液通常含有高濃度抗生素，目前這些廢母液主要是經(jīng)生活污水稀釋后，采用活性污泥法等常規(guī)生物工藝進行處理。抗生素作為一種抑菌或殺菌物質(zhì)，可影響污水生物處理系統(tǒng)的功能，并可能導致耐藥菌及耐藥基因的產(chǎn)生和排放。為了有效處理上述含抗生素廢水，需要在生物處理之前去除廢母液中抗生素殘留效價。強化水解技術(shù)已經(jīng)被證明具有削減鏈霉素、螺旋霉素和土霉素等抗生素效價的有效性。前期研究已表明林可霉素結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，難以通過溫度或 pH調(diào)節(jié)加速其水解過程，強化水解技術(shù)無法經(jīng)濟、有效地應用于其實際生產(chǎn)廢水的處理。為了保障林可霉素發(fā)酵廢水的安全、高效處理，須開發(fā)相應有效的預處理技術(shù)。

 

        大量研究表明，臭氧對水體中的硝基苯、酚類、氯化苯、多環(huán)芳香烴等有很好的去除效果，并且已成功應用于印染和石化等工業(yè)廢水的處理。LIU等考察了臭氧預處理土霉素實際廢水的效果，發(fā)現(xiàn)土霉素廢母液抗生素降解 50% 時消耗的臭氧量為 0.63 mg·mg−1土霉素，處理后污水不再誘導后續(xù)生物處理單元耐藥性發(fā)展。上述研究表明，臭氧氧化可以作為一種制藥廢水的預處理技術(shù)，然而，目前有關臭氧氧化處理林可霉素發(fā)酵廢水的研究較少。

 

        本研究以林可霉素發(fā)酵廢水的高效預處理為目標，利用配水實驗評價了臭氧氧化削減林可霉素效價的有效性，考察了共存基質(zhì)和反應 pH對林可霉素去除的影響，將臭氧預處理與厭氧生物處理技術(shù)耦合，處理實際林可霉素發(fā)酵廢水，討論了臭氧預處理對廢水生化處理的促進效果，以期為林可霉素廢水的處理提供參考。

 

實驗方法

        實驗裝置見圖 1。臭氧由臭氧發(fā)生器產(chǎn)生，臭氧氧化實驗在一個直徑 40 mm、高度為 600 mm、容量為700 mL的玻璃柱內(nèi)進行，實驗時將 100 mg·L−1的 500 mL抗生素溶液一次性轉(zhuǎn)入反應器中，臭氧是由玻璃柱底部的砂板進入反應體系，所有實驗在恒溫 (25 ℃)條件下進行。臭氧的濃度由臭氧監(jiān)測器 (Hare EG-600，Ebara Jitsugyo，日本)進行監(jiān)控，并用碘量法對臭氧濃度進行校 正，反應后的殘余臭氧由 5% 的 KI溶液吸收。臭氧濃度穩(wěn)定后開始計時，在不同反應時間從取樣口取4 mL樣品進行指標測試。

臭氧氧化反應裝置示意圖
 

 

測試及計算方法

        林可霉素濃度測定采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 (UPLC-MS/MS)方法，色譜柱為 ACQUITY UPLC BEH Shield RP18(1.7 μm × 2.1 mm × 100 mm，沃特世，美國)；柱溫為35 ℃；流速為0.3 mL·min−1；進樣量 5 μL；流動相 A為乙腈，流動相 B為 0.1% 甲酸水。梯度洗脫程序參考文獻中的方法[20]。電離方式為電噴霧電離 (ESI，正離子模式)，掃描方式為多反應監(jiān)測 (MRM)，毛細管電壓為 1.0 kV，離子源溫度為 150 ℃，脫溶劑溫度為 500 ℃，碰撞氣流量為 50 L·h−1，脫溶劑氣流量為 600 L·h−1。林可霉素母離子的m/z為406.9，子離子的m/z為125.9(定量離子)和359(定性離子)，錐孔電壓為30 V，碰撞電壓為25 V和22 V。

 

        抗生素效價是指某一物質(zhì)或水樣產(chǎn)生抑菌效果的功效單位。本實驗采用實驗室前期建立的方法[21]測定水樣的抗境生素效價，步驟如下：采用金黃色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus)作為標準菌株，分別采用廢水中相應的抗生素和參照標準抗生素作標準曲線，測得相應的抗生素效價當量。 1 mL的抗生素標準溶液或者待測樣品與 9 mL菌液混合，分別為標準曲線組和待測樣品組，同時設置了 1 mL磷酸鹽緩沖液 (PBS)和 9 mL菌液混合作為陽性對照，1 mL PBS和 9 mL不加菌液的抗生素Ⅲ號培養(yǎng)基混合作為空白對照。在 WBS-100微生物濁度法測定儀中 37 ℃條件下培養(yǎng) 4 h，間歇振蕩，從 45 min后每 10 min測定 580 nm下的光密度，光密度強弱反映細菌的生長情況。實驗結(jié)束后，得到 20組監(jiān)測數(shù)據(jù)，根據(jù)標準曲線的線性相關系數(shù)選擇標準曲線相關性高的一組數(shù)據(jù)，并根據(jù)此標準曲線計算樣品的效價當量。所有樣品的效價測定均為3個平行，計算平均值。

 

厭氧可生化性評價方法

 

厭氧可生化性實驗在 Bioprocess Control(瑞典)的甲烷自動測試系統(tǒng) (AMPTS-Ⅱ)中進行。實驗所用厭氧污泥取自北京市高碑店城市污水處理廠剩余污泥處理單元的中溫厭氧消化池。實驗在一個 500 mL的樣品瓶中進行，每個樣品瓶盛入 200 mL消化污泥 (VSS=2 000 mg·L−1)，分別加入 200 mL空白 (不加抗生素的溶液)、未處理過的林可霉素廢水 (林可霉素濃度為 1 000 mg·L−1)、臭氧處理后的林可霉素廢水(林可霉素濃度為4 mg·L−1)，其中對照組中的化學需氧量(COD)與實際廢水的COD (7 800 mg·L−1)相同，由醋酸鈉溶液配制，所有實驗組均設置 2個平行。實驗前溶液初始 pH用鹽酸和氫氧化鈉溶液調(diào)至7.00±0.05，氮吹3 min，將處理好的樣品瓶置于恒溫((35 ± 1) ℃)水浴鍋中。

 

結(jié)論

1) 臭氧氧化可有效降解林可霉素，降解過程符合一級降解動力學。

2) pH 升高可促進林可霉素的臭氧氧化，但同時加快了臭氧的消耗，故綜合考慮，建議在中性條件下處理林可霉素廢水。

3) 廢水中 COD 可延緩林可霉素的降解，每增加 COD 100 mg·L−1，單位抗生素實現(xiàn) 50%的削減需要增加的臭氧量約為 1.64 mg，此外，隨著反應的進行，反應環(huán)境向酸性發(fā)展會降低反應速率。

4) 臭氧預處理和厭氧生物處理的耦合工藝可以在有效降解林可霉素的同時，提高甲烷產(chǎn)率，具有實際應用潛力。